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抗酸染色法改進創造的細菌染色方法。其中，齊爾-尼爾森是具有代表性的結核菌。（Ziehl－Neelsen）齊爾-加貝特染色法和（Ziehl－Gabbet）染色方法。用石炭酸復紅染色后，用鹽酸酒精調色，再用美藍對比染色，即石炭酸復紅不再褪色。

抗酸染色原理：

分枝桿菌的細胞壁含有大量的脂肪，被肽聚糖包圍，所以分枝桿菌不容易上色，需要加熱和增加染色時間來上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合后，酸性脫色劑很難褪色，故稱抗酸染色。

齊-尼氏抗酸染色法是將分枝菌酸與石炭酸在加熱環境中復合成復合物，用硫酸乙醇處理后不會褪色。加入偏堿美蘭復染后，分枝桿菌仍為紅色，背景中的其他細菌和物質為藍色。

抗酸染色染液配制：

1、石炭酸復紅

堿性復紅乙醇飽和溶液10毫升

石炭酸5%90mL

2、3%硫酸乙醇

濃鹽酸3mL

95%乙醇97mL

3、呂氏美蘭液

30毫升美蘭乙醇飽和液

氫氧化鉀（1:10000）100mL

染色結果：

抗酸菌被染成紅色，抗酸陽性；其他細菌被染成藍色，抗酸陰性。背景細胞和雜質也被染成藍色。

注意事項：

通過改變染色時間或染色溫度，可以適當調整染色水平。

每一次試劑用完后，請迅速蓋上，以防揮發。

石炭酸對皮膚、粘膜有很強的刺激性和腐蝕性，使用時請穿實驗服和次性手套。

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