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革蘭氏染色液的特性與鑒定原理

文章出處:本站 人氣:1888 發表時間:2021-06-29 17:47:25

革蘭氏染色液屬復染法,即將標本固定后,先用龍膽紫染色,加碘液媒染后用酒精脫色,再用蕃紅復染。染色后除可以看到細菌形態外,還可將細菌分為兩大類,即不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌(G+)。被酒精脫色復染成紅色者為革蘭氏陰性菌(G-)。革蘭氏染色原理尚不肯定,可能與細菌所帶核糖核酸、細菌壁結構通透性、等電點等因素有關。致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、碳疽桿菌等屬革蘭氏染色陽性菌。百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等均屬革蘭氏陰性。


該染色法所以能將細菌分為G+菌和G-菌,是由這兩類菌的細胞壁結構和成分的不同所決定的。G-菌的細胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質,而且肽聚糖層較薄、交聯度低,故用乙醇或丙酮脫色時溶解了類脂質,增加了細胞壁的通透性,使初染的結晶紫和碘的復合物易于滲出,結果細菌就被脫色,再經蕃紅復染后就成紅色。G+菌細胞壁中肽聚糖層厚且交聯度高,類脂質含量少,經脫色劑處理后反而使肽聚糖層的孔徑縮小,通透性降低,因此細菌仍保留初染時的顏色,呈現藍紫色。


革蘭氏染色液在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果,假陽性主要是由于脫色不完全,可能是由于涂片過厚,或者是結晶紫染色過度,導致脫色不完全。假陰性可能是因為細胞固定過度,造成細胞壁通透性的改變,而出現假陰性結果;另外,細胞培養時間太長,可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶,也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。

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